|
Thông tin chi tiết sản phẩm:
|
| Tên sản phẩm: | sợi DNA | 10299ES40: | 40.000 U |
|---|---|---|---|
| 10299ES42: | 400.000 U | 10299ES83: | 1.600.000 U |
| Phân tử DNA đầu vào (pmol): | DNA đầu vào (ng) / [0,66 × Chiều dài trung bình DNA đầu vào (bp)] | Đăng kí: | CHỈ sử dụng cho nghiên cứu! |
| Điểm nổi bật: | 400 U / UL T4 DNA Ligase,Nghiên cứu T4 DNA Ligase,T4 DNA Ligase Thuốc thử sinh hóa |
||
T4 DNA ligase nhanh (400 U / µL)
Fast T4 DNA Ligase là một sản phẩm enzyme đơn có thể được sử dụng để kết nối các đoạn DNA và bộ tiếp hợp trong quá trình xây dựng thư viện NGS.Sản phẩm đã được xác minh bằng trình tự thông lượng cao và có chất lượng tuyệt vời.Enzyme này có khả năng liên kết hiệu quả cao, rất thích hợp để nối các đoạn axit nucleic phức tạp, chẳng hạn như bộ chuyển đổi Ω của nền tảng MGI.Chúng tôi khuyến nghị chọn Mô-đun nối DNA Hieff NGSTM Ultima (Cat # 12604) có thành phần cốt lõi là Fast T4 DNA Ligase cho những khách hàng không cần điều chỉnh hệ thống.
| tên sản phẩm | Con mèo# | Kích thước |
| Ligase DNA T4 nhanh (400 U / µL) | 10299ES40 | 40.000 U |
| 10299ES42 | 400.000 U | |
| 10299ES83 |
1.600.000 U |
Mô tả sản phẩm vềT4 DNA ligase nhanh
Fast T4 DNA Ligase là một sản phẩm enzyme đơn có thể được sử dụng để kết nối các đoạn DNA và bộ tiếp hợp trong quá trình xây dựng thư viện NGS.Sản phẩm đã được xác minh bằng trình tự thông lượng cao và có chất lượng tuyệt vời.Enzyme này có khả năng liên kết hiệu quả cao, rất thích hợp để nối các đoạn axit nucleic phức tạp, chẳng hạn như bộ chuyển đổi Ω của nền tảng MGI.Nên chọn Hieff NGSTMMô-đun nối DNA Ultima (Cat # 12604) có thành phần cốt lõi là Fast T4 DNA Ligase cho những khách hàng không cần điều chỉnh hệ thống.
Thành phần sản phẩms trong sốT4 DNA ligase nhanh
| Số thành phần | Các thành phần | Con mèo#/Kích thước | ||
| 10299ES40 | 10299ES42 | 10299ES83 | ||
| 10299-A | Ligase DNA T4 nhanh (400 U / µL) | 100 µL | 1 mL | 4 mL |
| 10299-B | Bộ đệm ligase DNA 10 × T4 | 250 μL | 5 × 500 μL | 10 mL |
Hướng dẫn
1. Các bộ công cụ xây dựng thư viện DNA chính thống hiện tại thường không được tinh chế sau khi sửa chữa kết thúc và xử lý A-Tailing, và trực tiếp thực hiện việc thắt bộ chuyển đổi.Hãy tham khảo cách chuẩn bị sau cho hệ thống phản ứng.Vortex kỹ, quay nhanh và ủ trong 15 phút ở 20 ° C.
| Các thành phần | Thể tích (μL) |
| DNA đuôi dA | 60 |
| Bộ đệm ligase DNA 10 × T4 | 10 |
| 50% PEG 6000 | 10* |
| Bộ tiếp hợp DNA | X** |
| Ligase DNA T4 nhanh (400 U / µL) | 1-5*** |
| ddH2O | Lên đến 100 |
[Ghi chú]:* 50% PEG 6000 không được cung cấp trong bộ, bạn cần tự chuẩn bị.
** Tham khảo bảng sau để biết số lượng bộ chuyển đổi.
*** Số lượngNhanhT4 DNA Ligase được sử dụng có thể được thêm 1-5 μL khi cần thiết.
2. Chất lượng và nồng độ của bộ điều hợp được sử dụng ảnh hưởng trực tiếp đến hiệu quả nối và năng suất thư viện.Việc sử dụng quá nhiều bộ điều hợp có thể tạo ra nhiều bộ điều chỉnh độ sáng bộ điều hợp hơn, trong khi việc sử dụng thấp hơn có thể ảnh hưởng đến hiệu quả nối và năng suất thư viện.Bảng sau liệt kê lượng bộ điều hợp được khuyến nghị được sử dụng trong các tình huống DNA đầu vào khác nhau bằng cách sử dụng bộ này.
| DNA đầu vào |
Bộ điều hợp: DNA đầu vào (tỷ lệ mol) |
DNA đầu vào |
Bộ điều hợp: DNA đầu vào (tỷ lệ mol) |
| 1 μg | 10: 1 | 50 ng | 100: 1 |
| 500 ng | 20: 1 | 25 ng | 200: 1 |
| 250 ng | 40: 1 | 1 ng | 200: 1 |
| 100 ng | 100: 1 | 500 pg | 400: 1 |
[Lưu ý]: Phân tử DNA đầu vào (pmol) ≈ DNA đầu vào (ng) / [0,66 × DNA đầu vào độ dài trung bình (bp)].
Bước 1: Tính số mol ADN đầu vào.Công thức: Nốt ruồi DNA đầu vào (pmol) ≈ DNA đầu vào (ng) / [0,66 × DNA đầu vào chiều dài trung bình (bp)];Số mol DNA đầu vào (pmol) = 100 ÷ (0,66 × 300) = 0,5 pmol;
Bước 2: Theo bảng trên, hãy tính số mol chất tiếp hợp;Khi DNA đầu vào là 100ng, tỷ lệ mol của các adapter: DNA đầu vào là 100: 1, và số mol của các adapter được thêm vào = 100 × 0,5 pmol = 50 pmol;
Bước 3: Tính khối lượng bổ sung bộ điều hợp.Nồng độ bộ chuyển đổi = 15 μmol / L (nếu bạn sử dụng bộ chuyển đổi của công ty khác, bạn cần xác định nồng độ của nó theo hướng dẫn của nó);Thể tích của bộ chuyển đổi được thêm vào = số mol của bộ chuyển đổi được thêm vào (50 pmol) ÷ nồng độ của bộ chuyển đổi (15 μmol / L) = 3,34 μL (Lưu ý: 15 μmol / L = 15 pmol / μL);
Tóm tắt, âm lượng mà bộ chuyển đổi có thể được thêm vào là 3,4 μL.(Lưu ý: Thể tích bổ sung tối đa của bộ chuyển đổi không vượt quá 5 μL).
Sản phẩm được vận chuyển với túi đá và có thể bảo quản ở -20 ° C trong hai năm.
Định nghĩa đơn vị
Trong hệ thống phản ứng thắt 20 μL, khi 6 μg λDNA-Hind Ⅲ được phản ứng ở 16 ℃ trong 30 phút, lượng enzyme cần thiết để cung cấp hơn 50% sự thắt của các đoạn DNA được xác định là một đơn vị (U).
Thận trọng
1. T4 DNA Ligase nhạy cảm với sự biến tính vật lý.Khi trộn, nhẹ nhàng lật ngược ống và lắc đều.Không lắc mạnh;
2. Khi sử dụng nên bảo quản enzym trong thùng đá hoặc trên chậu nước đá, và nên bảo quản ở nhiệt độ -20 ° C ngay sau khi sử dụng;
3.Sản phẩm này là dành cho chỉ sử dụng nghiên cứu!
4.Vì sự an toàn và sức khỏe của bạn, vui lòng mặc áo khoác phòng thí nghiệm và găng tay dùng một lần để vận hành.
Nếu bạn cần thêm thông tin về ligase DNA T4 nhanh (400 U / µL) này, vui lòng liên hệ với chúng tôi, xin cảm ơn
Người liên hệ: Ms Kris
Tel: +8613049739311
